[실험보고서] 단백질정량 bradford 실험 - 예비와 결과 보고서
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작성일 23-01-24 23:05
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다.
- 반응이 신속하게 진행된다. Coomassie brilliant blueG250, phosphoric acid, methanol의 혼합물로 시판되는 Bradford solution이 assay법에서 요구되는 유일한 reagent이며 단백질과Bradford solution의 반응은 2분 안에 완결되고 발색정도는 1시간까지 안정하게 유지된다.
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- 환원제와 EDTA의 effect을 거의 받지 않는다. 2. 실험 원리 단백질이 당질이나 지질과 다른 점은 탄소, 수소 그리고 산소 이외에도 반드시 질소를 함유하고 있는 특징을 가지고 있는 물질들을 말한다.
설명
- 희석시키면 농도가 떨어져서 다시 experiment(실험) 할 때 어려움이 있다
➀ Bradford Solution : Coomassie brilliant blueG250, phosphoric acid, methanol의 혼합물
- 사용한 단백질은 비가역적으로 변성된다.
1. 실험 목적 Bradford Assay를 사용하여 이미 정량된 특정 단백질을 정량하고, 이를 통해 미지의 단백질을 정량한다.
3)advantage(장점) :
3. experiment(실험)기구 및 시약
Bradford Assay를 사용하여 이미 정량된 특정 단백질을 정량하고, 이를 통해 미지의 단백질을 정량한다.
[실험보고서] 단백질정량 bradford 실험 - 예비와 결과 보고서
단백질이 당질이나 지질과 다른 점은 탄소, 수소 그리고 산소 이외에도 반드시 질소를 함유하고 있는 특징을 가지고 있는 물질들을 말한다.
➁ BSA(bovine serum albumin) : 혈장 내에 다량 함유되어 있는 단백질로서 총단백질의 약 60%를 차지하고 있음
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2. 실험 원리
- 감도가 높아서 1μg까지도 정량 가능하다.
4) 단점 :
- 방법이 간단하다.
1. 실험 목적
- 계면활성제의 effect을 받기 쉽다.
1) 특징 : Biuret method와 Lowry method의 단점을 보완한 단백질의 정량법
- 반응액이 산성이기 때문에 지질을 대량으로 함유하는 sample에서는 침전을 생성하는 경우가 있다
2) 원리 : 염색약인 Coomassie brilliant blue dye가 단백질과 결합하게 되면 최대 흡광 파장이 465nm에서 595nm로 바뀌게 되는 성질을 이용하여 595nm에서의 흡광량이 단백질의 농도를 나타내게 되는 방법이다.


